顯微鏡工作距離也叫物距（W.D.，Working Distance)：指試樣調準焦點時的物鏡前緣與試樣表面（或物鏡使用蓋玻片時，與蓋玻片頂面）的距離。

　　在物鏡數值孔徑一定的情況下，工作距離短孔徑角則大。 數值孔徑大的高倍物鏡，其工作距離小。所以定義顯微鏡工作距離大小，主要看物鏡的參數。若需要長工作距離的進行觀察，可選擇長工作距離物鏡（一般選配倒置顯微鏡）