熒光顯微鏡常用的激發(fā)光源為:
A、普通白熾燈B、紫外燈C、高壓汞燈D、氖燈E、鹵素?zé)?/span>
正確答案:C
熒光顯微鏡分析中常用激發(fā)光源的種類
在熒光分析中常用汞燈作激發(fā)光源,根據(jù)汞蒸氣壓的不同可分為低壓汞燈和高壓汞燈:
熒光顯微鏡常用的激發(fā)光源-汞燈
超高壓汞燈(50-200W),它是用石英玻璃制作,中間呈球形,內(nèi)充一定數(shù)量的汞,工作時(shí)由兩個(gè)電極間放電,引起水銀蒸發(fā),球內(nèi)氣壓迅速升高,當(dāng)水銀完全蒸發(fā)時(shí),可達(dá)50~70個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力,這一過程一般約需5~15min。超高壓汞燈的發(fā)光是電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果。它發(fā)射很強(qiáng)的紫外和藍(lán)紫光,足以激發(fā)各類熒光物質(zhì),因此,為熒光顯微鏡普遍采用。
推薦產(chǎn)品:歐司朗50W,103W,200W汞燈,適用于各大廠家高端熒光顯微鏡;一般200小時(shí)壽命,最長400小時(shí)
低壓汞燈:汞蒸氣,可發(fā)射出很強(qiáng)波長的射線,壽命很長,可長時(shí)間連續(xù)工作,射線對眼睛有害,不眼睛時(shí)不可長時(shí)間注視。
高壓汞燈:又叫高強(qiáng)度紫外線燈,汞蒸氣為1-數(shù)個(gè)大氣壓,可見炮區(qū)的譜線增強(qiáng),在紫外光區(qū),波長為365nm的光線更強(qiáng)。
中壓汞燈:可以發(fā)射一系列汞線組成的不連續(xù)光譜,除254nm波長以外,多數(shù)譜線都可作為校正波長使用。此外,還有超高壓汞燈、汞-氙燈、汞-鋅燈等。
熒光顯微鏡常用的激發(fā)光源-氫灑和氘燈
前者是燈泡中加氫蒸氣,經(jīng)閉合放電產(chǎn)生160-350nm波長的光,氫朋激發(fā)態(tài)返回的基態(tài)時(shí),就發(fā)射了氫的連續(xù)光譜,在160nm以下為線樂譜,氫燈和氘燈性能相同,其壽命也比氫燈長,因玻璃吸收紫外線,故燈殼要用石英制作,或在燈泡出光處開一石英窗,此光源適用于紫外光區(qū)的測定。
熒光顯微鏡常用的激發(fā)光源-氙燈
光的輻射能強(qiáng)度很高,它可在220-1100nm之間發(fā)射很強(qiáng)的連續(xù)光譜,可用于紫外區(qū),可見光及近紅外區(qū)的測定,雖其輻射范圍廣,使用中在生產(chǎn)高熱的同晨有臭氧味,其壽命短,燈泡內(nèi)壓較大,如日立牌650-60型熒光分光光度計(jì),氙燈平時(shí)約有7個(gè)大氣壓,點(diǎn)燃后可達(dá)30個(gè)大氣壓,故使用進(jìn)應(yīng)注意。
1、按裝緊固螺絲時(shí)用力應(yīng)均勻,勿成扭力,以免燈泡破裂爆炸。
2、勿用手觸及燈泡,以防受熱不均破裂。
3、如燈泡有油污,應(yīng)用雞皮藮酒精輕擦,不能用布、棉花等物擦拭。
氙燈和汞燈做為白光源,都能提供從紫外到近紅外一系列波長的光,但它們卻有著不同的激發(fā)光譜。汞燈集中在近紫外、藍(lán)光以及綠光附近,這種在峰值的高激發(fā)能量確保產(chǎn)生明亮的熒光信號,但光毒性卻很強(qiáng)。因此,HBO用來對固定樣品或弱熒光成像。相比而言,氙燈光源的激發(fā)比較平緩,可以用于不同波長間強(qiáng)度的比較,例如用于鈣離子濃度測量等。氙燈的強(qiáng)激發(fā)在近紅外800-1000nm。
XBO較HBO的特點(diǎn):
1)光譜強(qiáng)度更均勻
2)在紅外及中紅外仍有較強(qiáng)光譜強(qiáng)度
3)能量較強(qiáng)更易到達(dá)物鏡后孔徑
推薦產(chǎn)品:XBO75W,100W氙燈;壽命一般400小時(shí),1200小時(shí)
熒光顯微鏡常用的激發(fā)光源-金屬鹵素?zé)?/span>
這是近年來出現(xiàn)的一種光源,它和汞燈的激發(fā)光譜很像,但它和顯微鏡以光纖相連,能散熱,壽命更長。光纖從光源連到顯微鏡上,可以大量減少光產(chǎn)生的熱能。金屬鹵素?zé)魧罴?xì)胞成像的另一個(gè)優(yōu)勢是內(nèi)置強(qiáng)度設(shè)計(jì)裝置,可以容易調(diào)節(jié)激發(fā)光。
推薦產(chǎn)品:EXPO公司X-cite光源,120W,適用于各大廠家高端熒光顯微鏡;壽命2500小時(shí)以上。
熒光顯微鏡常用的激發(fā)光源-LED
近來,還出現(xiàn)了一種新的熒光光源:LED,這種光源的開關(guān)在毫秒間,減少樣品在光照下的暴露時(shí)間,延長壽命。另外,LED光的衰減即快又精確,長期活細(xì)胞試驗(yàn)下可大大減少光毒性。和白光相比,LED僅僅在一個(gè)較窄的光譜激發(fā),多個(gè)LED波段使得LED光源能為多色熒光提供應(yīng)用。
推薦產(chǎn)品:蔡司Colibri,壽命普遍在幾千個(gè)小時(shí)。
熒光顯微鏡的使用注意事項(xiàng)是哪些?
熒光顯微鏡是由生物顯微鏡和落射熒光裝置組成,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、材料科學(xué)等領(lǐng)域。常規(guī)的配置B、G、BV、V、U五個(gè)波段可轉(zhuǎn)換,還可同時(shí)進(jìn)行常規(guī)透射觀察。和常規(guī)的顯微鏡一樣,操作時(shí),需輕拿輕放。在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。熒光顯微鏡光源壽命有限,標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時(shí)間,保護(hù)光源。燈熄滅后欲再用時(shí),須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。
如何更換顯微鏡的燈泡?
更換顯微鏡的燈泡,步驟如下:
1.把顯微鏡仰倒。然后,拉出鏡架下面的燈室旋鈕,打開燈室蓋。
2.隔著包裝袋握住燈泡,不要在燈泡上留下指紋。將觸腳完全插入燈座。正確安裝后,拉掉聚乙烯包裝袋。
3.將燈室旋鈕保持拉出狀態(tài),蓋上燈室蓋。然后推進(jìn)燈室旋鈕,鎖住燈室蓋。
需要注意的是:始終使用指定燈泡。使用其他燈泡有可能導(dǎo)致著火,不要用手觸摸燈泡,如果偶然不小心在燈泡上留下指印,用一塊無毛軟布蘸一些酒精擦凈。使用被污染的燈泡會縮短燈泡使用壽命。
LED熒光顯微鏡光源介紹
在LED前,熒光顯微鏡常用光源為高壓汞燈,在LED激發(fā)光源普遍后,就成為熒光顯微鏡的主要光源。LED發(fā)射的單色光位于相對較窄的光譜帶中,半高寬約為10nm-40nm,相對于高壓汞燈,LED激發(fā)光源有幾個(gè)重要優(yōu)勢:1)額定使用壽命可達(dá)3000小時(shí)以上,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過其他光源;2)整個(gè)額定使用壽命期間,其輸出強(qiáng)度保持相對穩(wěn)定,確保激發(fā);3)LED啟動(dòng)和關(guān)閉時(shí)間短,即開即用,不需要預(yù)熱;4)LED光效高,且亮度連續(xù)可調(diào);5)體積小、輕便,且為冷光源,彌補(bǔ)汞燈的大功率、發(fā)熱、使用復(fù)雜燈問題,大大的降低了熒光顯微鏡使用成本并提高熒光顯微鏡操作的簡便性。
對于熒光顯微鏡來說,尤其是單色激發(fā)的熒光顯微鏡,LED具有非常大的吸引力,例如B波段激發(fā)的熒光探針FLTC/GFP標(biāo)記的樣板,在藍(lán)光LED激發(fā)下了可以獲得非常好的圖像,而廣泛應(yīng)用于免疫熒光檢測領(lǐng)域。多波段LED光源可選,并可控制每一個(gè)LED的亮度,可以實(shí)現(xiàn)多波長的選擇激發(fā),便捷。熒光色:365nm紫光;395nm純藍(lán);455nm藍(lán)綠色;505nm綠色:;530nm純綠色;590nm黃色;630nm紅色,更多關(guān)于多波段LED顯微鏡熒光激發(fā)光源SL169,