光學(xué)顯微鏡：是利用光學(xué)原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，以供人們提取微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。

    熒光顯微鏡：熒光顯微鏡是以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。

    熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡的區(qū)別

    熒光顯微鏡的光源主要采用氙弧燈或汞燈，但近年來也使用高功率LED作光源，而普通光學(xué)顯微鏡通常只有鹵素或LED燈來照明。熒光顯微鏡的照明方式一般是用落射式，也就是說光源是通過物鏡來投放于試驗樣本上，而普通光學(xué)顯微鏡是直接用光源照射樣品，從而進(jìn)行的觀察。在分辨率上講，熒光顯微鏡利用的是紫外線光源，波長比較短，但是分辨率卻高于普通的光學(xué)顯微鏡。在濾光片的使用上，熒光顯微鏡是用了兩個特殊的濾光片，在光源前的作用是用來濾出可見光，在物鏡和目鏡之間的作用是用來濾出紫外線，以保護(hù)觀察者的眼睛。熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡的區(qū)別大致就是這些。

    光學(xué)顯微鏡一般由載物臺、聚光照明系統(tǒng)、物鏡，目鏡和調(diào)焦機(jī)構(gòu)組成。聚光照明系統(tǒng)通過改變照明方式，可以獲得亮背景上的暗物點(稱亮視場照明)或暗背景上的亮物點(稱暗視場照明)等不同的觀察方式，以便在不同情況下更好地發(fā)現(xiàn)和觀察微細(xì)結(jié)構(gòu)。

    熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡的區(qū)別就是照明方式、分辨率、濾光片的使用上的不同，通俗來講，熒光顯微鏡是普通光學(xué)顯微鏡的一個分支，只是在生物研究中用來細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。具體有以下的區(qū)別:

    1、在照明方式上看

    熒光顯微鏡的照明方式一般是用落射式，也就是說光源是通過物鏡來投放于試驗樣本上。

    2、在分辨率上看

    熒光顯微鏡利用的是紫外線做為光源，波長比較短，但是分辨率卻高于普通的光學(xué)顯微鏡。

    3、在濾光片上的不同

    熒光顯微鏡是用了兩個特殊的濾光片，在光源前用是用來濾出可見光，在物鏡和目鏡之間的使用來濾出紫外線，這樣可以保護(hù)人的眼睛。

    熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種，主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。

    熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。

    熒光顯微鏡工作原理

    多采用200W的超高壓汞燈作光源，它是用石英玻璃制作，中間呈球形，內(nèi)充一定數(shù)量的汞，工作時由兩個電極間放電，引起水銀蒸發(fā)，球內(nèi)氣壓迅速升高，當(dāng)水銀完全蒸發(fā)時，可達(dá)50～70個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力，這一過程一般約需5～15min。超高壓汞燈的發(fā)光是電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果。它發(fā)射很強(qiáng)的紫外和藍(lán)紫光，足以激發(fā)各類熒光物質(zhì)，因此，為熒光顯微鏡普遍采用。

    1．激發(fā)濾板根據(jù)光源和熒光色素的特點，可選用以下三類激發(fā)濾板，提供一定波長范圍的激發(fā)光。

    紫外光激發(fā)濾板：此濾板可使400nm以下的紫外光透過，阻擋400nm以上的可見光通過。常用型號為UG-1或UG-5，外加一塊BG-38，以除去紅色尾波。

    紫外藍(lán)光激發(fā)濾板：此濾板可使300～450nm范圍內(nèi)的光通過。常用型號為ZB-2或ZB-3，外加BG-38。

    紫藍(lán)光激發(fā)濾板：它可使350～490nm的光通過。常用型號為QB24（BG12）。

    最大吸收峰在500nm以上者的熒光素（如羅達(dá)明色素）可用藍(lán)綠濾板（如B-7）激發(fā)。